新试纸可在10秒内检测出番茄病毒 适用于田间大批量检测

用滴管从番茄叶中挤出汁液，用适当的水稀释，然后轻轻放入一张试纸。大约10秒钟后，纸张上清晰出现两条暗红色条纹，这是叶片感染番茄棕色皱纹果病毒(简称ToBRFV)的标志。

这一幕发生在山东农业大学植物病毒学实验室。近日，当记者来到实验室时，实验室负责人、植物病毒学专家李向东教授告诉记者：“这是我们实验室刚准备的番茄褐皱果病毒试纸条。与其他检测方法相比，具有灵敏度高、特异性强、使用方便、操作简单等特点，非常适合现场大量样本的检测，对病毒的精准监测和预警具有重要作用。”

番茄褐褶果病毒是一种新型病毒，可通过种子、接触和熊蜂传播，严重威胁番茄的安全生产。ToBRFV最早在约旦和以色列报道，随后相继出现在美洲、欧洲、非洲等国家，引起国际关注，被多个国家列为检疫对象。

今年4月9日，农业农村部和海关总署联合发布的《中华人民共和国进境植物检疫性有害生物名录》也将ToBRFV列为检疫对象。

快速识别和早期预警对禽流感的预防和治疗至关重要。目前，ToBRFV的检测方法包括多重PCR、荧光定量等。所有这些都需要精密的仪器或专业的操作人员。但李向东实验室研制的胶体金免疫试纸条操作简单，几秒钟或几分钟内肉眼观察即可判断，非常适合现场检测。

据李向东介绍，他们实验室利用杂交瘤技术制备了17株抗ToBRFV单克隆抗体，将2株单克隆抗体固定在胶体金垫和硝酸纤维素膜上进行结合，制备了胶体金试纸条，共获得272对。通过特异性测定，筛选出一组配对抗体制备的试纸条。从稀释12800倍的番茄叶病汁液(含番茄叶约8微克)中可检测到ToBRFV，快速灵敏，但与其他番茄斑驳花叶病毒和番茄花叶病毒无反应，后者属于烟草花叶病毒属，氨基酸识别率在85%以上，也感染番茄。

“我们同时在辣椒上做了实验，结果同样理想。目前，这一成果已申请国家发明专利，并已在山东、河北、河南、江苏、安徽等地的农业技术推广部门和企业试用。”李向东说。